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qPCR實驗板:40ul全裙邊384孔PCR板透明加白色

更新時間:2025-09-10    點擊次數(shù):291

  qPCR實驗板:40ul全裙邊384孔PCR板透明加白色

  本是詳細(xì)解析一下“40ul 全裙邊 384孔 PCR板 透明加白色"的含義、特點和應(yīng)用。這通常指的是一種專為高通量實時熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計的微孔板。

  一、解析

  40ul:

  指每個孔的最大推薦工作容積。這意味著每個孔可以安全地容納最多40微升的反應(yīng)體系。

  實際使用時,常見的反應(yīng)體積在10-20μl之間(為了降低成本和避免蒸發(fā)),但板子的設(shè)計保證了即使加到40μl也不會溢出或難以密封。

  它也暗示了孔的設(shè)計容積(可能為50-60μl甚至更大),以確保有足夠的空間。

  全裙邊 :

  裙邊是指PCR板四周的突出邊緣。

  全裙邊意味著裙邊是完整且?guī)в袡C械加工孔的。這是最高規(guī)格的裙邊設(shè)計。

  優(yōu)點:

  機械強度:不易彎曲變形,在自動化處理中至關(guān)重要。

  自動化兼容性:邊緣的孔可以與自動化工作站(機械臂)的定位銷匹配,實現(xiàn)精確定位和抓取,減少誤差。

  更好的密封性和穩(wěn)定性:為熱封或壓蓋提供更堅固的支撐。

  384孔:

  指板的規(guī)格。標(biāo)準(zhǔn)384孔板有16行 x 24列,孔數(shù)是一般96孔板的4倍。

  優(yōu)點:通量,顯著降低單個樣本的試劑成本和耗材成本(因為反應(yīng)體積更小),節(jié)省儀器運行時間和實驗室空間。

  缺點:對移液操作精度要求高,通常需要依賴384通道的電子移液器或自動化液體處理工作站。


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  透明加白色:

  這是指板的材質(zhì)和光學(xué)設(shè)計,是qPCR應(yīng)用的核心關(guān)鍵。

  白色板體:板的基座和孔壁是白色的。白色是一種高反射材料,其作用是將反應(yīng)中產(chǎn)生的熒光信號高效地反射回孔的上方,以便被儀器的光學(xué)檢測器捕獲。

  優(yōu)點:極大提高熒光信號強度,減少孔與孔之間的信號串?dāng)_,提升數(shù)據(jù)的靈敏度和準(zhǔn)確性。特別適合多重?zé)晒鈾z測和低豐度基因的定量。

  透明蓋/透明孔:通常指板蓋是光學(xué)透明的,或者孔壁雖然是白色但底部非常薄且透明。

  優(yōu)點:透明的蓋子允許qPCR儀的光學(xué)系統(tǒng)從上方無障礙地讀取每個孔的熒光信號。透明的孔底則允許進(jìn)行終點PCR后的凝膠電泳分析(無需轉(zhuǎn)板),但這不是主要功能。

  這種“透明蓋+白色孔"的組合是目前高性能qPCR的黃金標(biāo)準(zhǔn),在信號強度和信噪比之間取得了最佳平衡。

  二、主要特點與優(yōu)勢總結(jié)

  高通量:384孔設(shè)計,一次運行最多處理384個樣本(通常包括標(biāo)準(zhǔn)曲線、復(fù)孔等)。

  高靈敏度與高精度:白色孔壁熒光收集效率,孔間串?dāng)_,提供優(yōu)異的qPCR數(shù)據(jù)質(zhì)量。

  自動化兼容性:全裙邊設(shè)計使其適配各類液體處理機器人和高通量篩選平臺。

  熱學(xué)性能優(yōu)異:通常由聚丙烯(PP)制成,導(dǎo)熱快,保證孔間溫度均一性,提升擴增效率一致性。

  三、主要應(yīng)用場景

  超高通量基因表達(dá)分析(RNA-Seq驗證、大規(guī)模樣本篩查)。

  藥物基因組學(xué)與基因分型。

  病原體大規(guī)模檢測。

  下一代測序(NGS)文庫的質(zhì)控:對構(gòu)建好的文庫進(jìn)行qPCR定量。

  任何需要處理大量樣本,并且對數(shù)據(jù)精密度和準(zhǔn)確性要求的qPCR實驗。

  四、使用注意事項

  儀器兼容性:務(wù)必確認(rèn)您的qPCR儀支持384孔板運行(例如:ABI QuantStudio 5/6/7, Bio-Rad CFX384, Roche LightCycler 480等)。


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  密封方式:

  光學(xué)透明粘性封板膜:需用壓板器確保密封均勻,防止蒸發(fā)。

  透明硬質(zhì)蓋板:有些系統(tǒng)使用可重復(fù)使用的硬質(zhì)蓋板。

  液體操作:強烈建議使用電子移液器或自動化工作站進(jìn)行分液,以確保精度和可重復(fù)性,并保護(hù)操作者免受重復(fù)性勞損(RSI)。

  實驗設(shè)計:由于孔數(shù)多,更容易產(chǎn)生邊緣效應(yīng)(邊緣孔蒸發(fā)更快),需要在實驗布局時加入更多的技術(shù)重復(fù)和對照,并使用ROX等被動參比染料來校正孔間差異。

  注:以上資料僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),如需具體產(chǎn)品資料請咨詢技術(shù)老師或品牌商。

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